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1、斐林试剂配制方法:0.1 g/mI NaOH(甲液)和0.05 g/mI CuSO4(乙液)。甲液配制方法是将125 g氢氧化钠和137 g酒石酸钾钠溶于500 mI,蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是将34.5 g结晶硫酸铜溶于500 ml水中,加0.5 mI硫酸。混合均匀。
2、测试还原糖原理:斐林试剂是二价铜离子的酒石酸钾钠配合物,可以被脂肪醛或还原性糖还原为氧化亚铜。斐林试剂为深蓝色溶液,与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。
3、斐林试剂的使用方法:一般将斐林试剂甲液和乙液等体积混合(或在2 mL甲液中滴4~5滴乙液),再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热。如待测液中存在还原糖,则呈现砖红色沉淀;如待测液中不存在还原糖,则仍然呈蓝色。
扩展资料:
1、斐林试剂(Fehling's solution)是德国化学家赫尔曼·冯·斐林(Hermann von Fehling,1812年--1885年)在1849年发明的。常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在。斐林试剂与单糖中的还原性糖(葡萄糖、果糖等)反应生成砖红色沉淀。
2、斐林试剂需要现配现用,新配置的Cu(OH)2溶液呈悬浊液,与还原糖反应最充分,砖红色的Cu2O生成也最多,均匀饱满的分布在溶液中。放置后的Cu(OH)2溶液,一方面会发生沉淀,影响与还原糖的接触面,另一方面Cu(OH)2自身发生分解反应,生成CuO黑色沉淀,都会影响实验效果。
参考资料:
斐林试剂的原理如下:
一、斐林试剂
斐林试剂是一种可以鉴别还原性物质的试剂,一般由氢氧化钠与硫酸铜溶液配成,由德国化学家赫尔曼·冯·斐林在1849年发明的。斐林试剂常用于鉴定可溶性的还原性糖的存在,可与还原性糖反应生成砖红色沉淀。
1849年,德国化学家斐林发明了斐林试剂。它是由氢氧化钠的含量为0.1g/mL的溶液和硫酸铜的含量为0.05g/mL的溶液,还有含量为0.2g/mL酒石酸钾钠配制而成的,其本质是铜离子和酒石酸形成的配合物——酒石酸合铜(高中认为是新制的氢氧化铜)。
二、配置方法
配制方法:0.1g/mLNaOH(甲液)和0.05g/mLCuSO4(乙液)。甲液配制方法是将50g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500mL蒸馏水中(贮于带橡皮塞的瓶中)。乙液配制方法是将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中,加0.5mL硫酸。混合均匀。
斐林试剂的使用方法:一般将斐林试剂甲液和乙液等体积混合(或在2mL甲液中滴4~5滴乙液),再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热或直接加热。如待测液中存在还原糖,则呈现砖红色沉淀;如待测液中不存在还原糖,则仍然呈蓝色。
三、原理
不可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀。其颜色变化顺序为:浅蓝色-棕色-砖红色沉淀。
斐林试剂由两种主要成分组成:碱性铜离子和磷钼酸。当斐林试剂与酚类化合物发生反应时,会产生蓝色化合物。这个蓝色化合物的颜色与酚类化合物的浓度成正比,可以利用光谱分析或比色法来检测和测定目标物质的含量。
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